Agilent Effect of pH on Protein Size Exclusion Chromatography 说明书(1)

pH对蛋白质的分子大小排阻色谱应用的影响。蛋白质的结构对于理解许多蛋白质的功能至关重要。分子大小是结构的指示器,提供了关于蛋白质的四级结构的信息。许多蛋白质在不同的溶液条件下发生深刻的构象变化,其中最极端的是变性。pH、离子强度、温度和其他溶液条件的变化可能导致类似的结构改变。蛋白质由氨基酸组成,其中一些具有带有极性侧链或含有酸性或碱性基团。在等电点处,蛋白质是不带电荷的,相似功能团之间的电荷排斥将最小化,从而允许聚集发生。许多蛋白质在这些条件下沉淀,即使对于在等电点下保持在溶液中的蛋白质而言,这也是最低溶解度的pH。在生理pH下,大多数蛋白质都高于它们的等电点,并具有净负电荷。低于等电点的pH会使酸性基团质子化,并使蛋白质带有净正电荷。在每种情况下,形成的相同电荷会相互排斥,从而减少蛋白质聚集的可能性。但是,在较大电荷密度的区域,分子内排斥可能导致蛋白质三级结构的不稳定和随后的展开。在某些情况下,这种展开可能导致...


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